從這四個(gè)方面來(lái)認(rèn)識(shí)
超微量分光光度計(jì)
超微量分光光度計(jì)設(shè)計(jì)原理和工作原理,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準(zhǔn)確度和度。另外,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測(cè)試時(shí),離子濃度太高,也會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大穩(wěn)定讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測(cè)試效果。為了較大程度減少顆粒對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值較好在0.1-1.。在此范圍內(nèi),顆粒的干擾相對(duì)較小,結(jié)果穩(wěn)定。
超微量分光光度計(jì)是一類(lèi)很重要的分析儀器 ,無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門(mén) ,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)都有廣泛而重要的應(yīng)用。分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。超微量分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
超微量分光光度計(jì)可以對(duì)dsDNA、ssDNA、RNA等不同類(lèi)型核酸的濃度進(jìn)行快速測(cè)量,并可以計(jì)算這些核酸在260nm、280nm處的吸光值,也可以檢測(cè)菌液OD600值及監(jiān)測(cè)懸浮細(xì)胞生長(zhǎng)情況,具體優(yōu)勢(shì)主要有以下四個(gè)方面:
1.紫外檢測(cè):超微量分光光度計(jì)可以在常規(guī)紫外光波長(zhǎng)下檢測(cè)樣品吸光值,不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性,而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太敏感。
2.核酸檢測(cè):可檢測(cè)dsDNA、ssDNA、RNA等不同類(lèi)型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值;
3.蛋白檢測(cè):檢測(cè)普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值,BCA、Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
4.
超微量分光光度計(jì)還能用于其他項(xiàng)目的檢測(cè),比如:菌液/懸浮細(xì)胞濃度檢測(cè),動(dòng)力學(xué)檢測(cè),全波長(zhǎng)掃描,探針檢測(cè),用戶自定義檢測(cè)等。